产品货号：
KD1640
中文名称：
1M山梨醇溶液/酵母电转感受态细胞制备液(过滤除菌)
英文名称：
1M Sorbitol Solution
产品规格：
100mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
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保存：2～8℃
1M的山梨醇一般用于酿酒酵母或者裂殖酵母电转感受态的制备。
酵母感受态细胞的制备：
1.活化菌种。-80℃保存的菌种在固体YPDA培养基(YPDA加20g Agar/L)上划线，在30℃培养2～4天。
2.挑取酵母单菌落在固体YPDA培养基上划3～5mm的短线，在30℃培养2～4天。待酵母单菌落长至2mm长时，接种。
3.首先把酵母细胞接种到50mL液体YPDA培养基的三角瓶中继续培养，待OD600到1.3～1.5范围内。
4.将酵母菌置于冰上放置10min后，收集细胞。1000g，离心5min，去上清。
5.沉淀用30～50mL的预冷的无菌水悬浮。1000g，离心5min，去上清。重复洗涤2次。
6.沉淀用5mL冰上预冷的1M山梨醇溶液重悬。1000g，离心5min，去上清。
7.沉淀用0.4mL的预冷的1M山梨醇溶液重悬，按照40μL分装。
酵母转化：
1.在40μL的酵母感受态细胞中，加入5μL(100ng)的质粒，混匀。
2.转移到预冷的电转槽中，电击。
3.在电转槽中加入500μL预冷的1M山梨醇溶液，轻柔混匀。
4.涂布于相应的筛选培养基上，28～30℃培养3～5天。
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